Masse spektrometer kan være mindre enn en mynt, eller de kan fylle ut veldig store rom. Selv om de ulike instrument typer tjene i svært ulike programmer, som de likevel dele visse operasjonelle grunnprinsipper. Måleenhetene som har blitt Dalton (Da) fortrenge andre vilkår som for eksempel amu. 1 Da = 1/12 av massen til et eneste atom av isotopen karbon-12 (12C).
Når er ansatt strengt som kvalitative enheter-adjuncts i å bestemme sammensatte identitet-masse spektrometer en gang ble ansett som ute av stand til strenge kvantifisering., Men i nyere tid, de har vist seg som både kvalitative og kvantitative instrumenter.
En masse spektrometer kan måle massen til et molekyl bare etter den konverterer molekylet til en gass-fase-ion. For å gjøre det, den formidler en elektrisk ladning, molekyler og konverterer den resulterende flux av elektrisk ladde ioner i en proporsjonal elektrisk strøm som et data system så leser. Data system konverterer strøm til digital informasjon, vise det som en masse spektrum.,
a) Øke overflod i den totale ion-nåværende (TIC) er representert som det endringer over tid i en kromatografiske-lignende spor. b) Hver digital bit av en topp representerer ioner på den tiden å gjøre opp ion gjeldende ofte referert til som en profil eller kontinuum oppkjøp. T han x eller ‘tid’ – aksen er nå masse-til-kostnad-forhold (m/z) evnen til å løse nærliggende ioner i spektrum (for eksempel isotoper) er lett sett., c) En profil spekteret er ofte redusert til en «stick plot» representert ved centroids falt fra hver topp apex redusere størrelsen på den lagrede filen i favør av den økte oppløsningen informasjon.,d i en rekke måter, som er best egnet mål analytt i spørsmålet:
-
Med laser ablasjon av et sammensatt oppløst i en matrise på en plan overflate, for eksempel ved MALDI
-
Ved interaksjon med en strømførende partikkel eller electron, for eksempel i electron ionisering (EI)
-
En del av transport prosessen i seg selv som vi har lært å kjenne electrospray (ESI) hvor eluent fra en væske chromatograph får en høy spenning som resulterer i ioner fra en aerosol
ionene er separert, registrert og målt i henhold til deres masse-til-kostnad-forhold (m/z)., I forhold ion-nåværende (signal) er plottet mot m/z produsere en masse spektrum. Små molekyler vanligvis viser bare en enkelt lading: m/z er derfor litt masse (m) over 1. Den ‘1’ være en proton lagt i ionisering prosess eller hvis ion er dannet ved tap av et elektron det er representert som den radikale kasjon . Nøyaktigheten av et mass spectrometer eller hvor godt det kan måle den faktiske sann masse kan variere som vil bli sett i senere deler av denne primer.
Større molekyler ta avgiftene i mer enn ett sted i deres struktur., Små peptider vanligvis kan ha to ladninger (M+2H+), mens svært store molekyler har en rekke nettsteder, slik at enkle algoritmer for å utlede masse av ion representert i spektrum.
Lav oppløsning instrumenter kan levere eksepsjonell nøyaktige masse når den er riktig kalibrert, men som mer data folkemengder sine begrenset oppløsning plass gir mindre informasjon om spekteret., En felles metabolske fragment (BK1-5 eller Arg-Pro-Pro-Gly-Phe) av Bradykinin, en 9-amino acid peptid, ACE (angiotensin converting enzyme) hemmer som brukes til å utvide blodårene kan bære to ladninger (én lading eller M+H gir monoisotopic verdi 573.3149 mens dobbelt belastet versjon eller M+2H viser 287.1614). Isotoper er dobbelt belastet så vel begynne å fylle den tilgjengelige oppløsningen plass.
Hvor stort et molekyl kan jeg analysere?
Desorpsjon metoder (som er beskrevet i denne primer) har utvidet evne til å analysere store, ikke-flyktig, skjøre molekyler., Rutinemessig påvisning av 40 000 Da i 0.01% nøyaktighet (eller innen 4 Da) tillater bestemmelse av mindre endringer som for eksempel post-translational endringer. Flere lading utvider utvalget av mass spectrometer langt utover det den er beregnet øvre grense for å inkludere massene 1 000 000 Da eller mer.
Isotop og elementær mass spectrometry
Naturlig isotop overflod er godt karakterisert. Om enn ofte antatt å være stabil, kan det likevel vise vesentlige og karakteristiske avvik., Trauma forholdet målinger er brukt i den metabolske studier (isotop-beriket elementer tjene som sporstoff) og også i klimatiske undersøkelser som måler temperatur avhengige av oksygen og karbon endringer. I praksis, komplekse molekyler er redusert til enkle molekylære komponenter før de blir målt ved hjelp av høy nøyaktighet evner, slik som de som finnes på magnetiske sektor instrumenter (se neste avsnitt).
Elementær analyse er vanligvis utføres på uorganiske materialer-for å finne ut av grunnstoffet makeup, ikke struktur-i noen tilfeller ved hjelp av solid metall prøver., Induktivt koplet plasma (ICP) kilder er vanlig hvor en utladning (eller lavere strøm-glow utslipp) enheten ionizes prøven. Deteksjon ved hjelp av dedikert instrumenter, i deler per billion nivå, er ikke uvanlig.
| < Forrige | Neste > |