massespektrometre kan være mindre end en mønt, eller de kan fylde meget store rum. Selvom de forskellige instrumenttyper tjener i meget forskellige applikationer, deler de ikke desto mindre visse grundlæggende funktioner. Måleenheden er blevet Dalton (da), der fortrænger andre udtryk som amu. 1 Da = 1/12 af massen af et enkelt atom af isotopen af kulstof 12 (12C).
en gang anvendt strengt som kvalitative enheder-adjukter til bestemmelse af sammensat identitet-massespektrometre blev engang betragtet som ude af stand til streng kvantificering., Men i nyere tid har de vist sig som både kvalitative og kvantitative instrumenter.
et massespektrometer kan kun måle massen af et molekyle, efter at det omdanner molekylet til en gasfaseion. For at gøre det, det giver en elektrisk ladning til molekyler og omdanner den resulterende Flu.af elektrisk ladede ioner til en proportional elektrisk strøm, som et datasystem derefter læser. Datasystemet konverterer strømmen til digital information og viser den som et massespektrum.,
a) stigende overflod i den totale ionstrøm (TIC) er repræsenteret, da den ændrer sig over tid i et kromatografisk lignende spor. B) hver digital skive af en top repræsenterer de ioner på det tidspunkt, der udgør ionstrømmen, der ofte omtales som en profil eller kontinuumoptagelse. T han or eller’ tid ‘ akse er nu masse-til-ladningsforhold (m/)) evnen til at løse tilstødende ioner i spektret (såsom isotoper) ses let., c) et profilspektrum reduceres ofte til et ‘stick-plot’ repræsenteret af centroider, der er faldet fra hver topspids, hvilket reducerer størrelsen på den lagrede fil til fordel for den øgede opløsningsinformation.,d i en række måder, som passer til de mål analyt i spørgsmål:
-
Af laser ablation af et stof, der er opløst i en matrix på en plan overflade, såsom ved MALDI
-
Af interaktion med en strømførende partikel eller elektron som i elektron ionisering (EI)
-
En del af transport-processen i sig selv, som vi er kommet til at kende electrospray (ESI), hvor opløsningsmiddel fra en flydende kromatografen modtager en høj spænding, der resulterer i ioner fra en aerosol
ioner er adskilt, kan registreres og måles i forhold til deres masse-at-afgift nøgletal, (m/z)., Relativ ionstrøm (signal) er plottet versus m/. producerer et massespektrum. Små molekyler udviser typisk kun en enkelt ladning: m/. er derfor en vis masse (m) over 1. ‘1’ er en proton tilsat i ioniseringsprocessen, eller hvis ionen dannes ved tab af en elektron, repræsenteres den som den radikale kation . Nøjagtigheden af et massespektrometer eller hvor godt det kan måle den faktiske sande masse kan variere, som det ses i senere sektioner af denne primer.
større molekyler fanger ladninger på mere end et sted inden for deres struktur., Små peptider kan typisk have to ladninger (m+2H+), mens meget store molekyler har adskillige steder, hvilket tillader enkle algoritmer at udlede massen af den Ion, der er repræsenteret i spektret.
lavopløsningsinstrumenter kan levere enestående nøjagtig masse, når den er korrekt kalibreret, men da flere data skarer, giver dens begrænsede opløsningsrum mindre information om spektret., En fælles metaboliske fragment (BK1-5 eller Arg-Pro-Pro-Gly-Phe) af Bradykinin, en 9 aminosyre peptid, ACE (angiotensin converting enzyme) – hæmmer, der anvendes til at dilatere blodkar kan bære to afgifter (enkelt opladning eller M+H udbytter monoisotopic værdi 573.3149 mens dobbelt opkrævet version eller M+2H viser 287.1614). Isotoperne er dobbelt opladet samt begynde at fylde den tilgængelige opløsning plads.
Hvor stort et molekyle kan jeg analysere?
Desorptionsmetoder (beskrevet i denne primer) har udvidet evnen til at analysere store, ikke-flygtige, skrøbelige molekyler., Rutinemæssig detektion af 40,000 Da inden for 0.01% nøjagtighed (eller inden for 4 Da) tillader bestemmelse af mindre ændringer, såsom post-translationelle modifikationer. Flere opladninger udvider massespektrometerets rækkevidde langt ud over den designede øvre grænse til at omfatte masser på 1.000.000 Da eller mere.
isotop og elementær massespektrometri
naturlig isotop overflod er godt karakteriseret. Selvom det ofte menes at være stabilt, kan det ikke desto mindre vise betydelige og karakteristiske afvigelser., Isotopforholdsmålinger anvendes i metaboliske undersøgelser (isotopberigede elementer tjener som sporstoffer) og også i klimatiske undersøgelser, der måler temperaturafhængige ilt-og kulstofændringer. I praksis reduceres komplekse molekyler til enkle molekylære komponenter, før de måles ved hjælp af høj nøjagtighed, såsom dem, der findes på magnetiske sektorinstrumenter (se følgende afsnit).
elementær analyse udføres typisk på uorganiske materialer-for at bestemme elementær makeup, ikke struktur-i nogle tilfælde ved hjælp af faste Metalprøver., Induktivt koblet plasma (ICP) kilder er almindelige, hvor en udledning (eller lavere effekt-glød udledning) enhed ioniserer prøven. Detektion ved hjælp af dedikerede instrumenter, på dele-per-billioner niveau, er ikke ualmindeligt.
| < Forrige | Næste > |