formål analysens udvikling og screening i drug discovery
Analyser er undersøgelsesprocedurer, der kvalitativt vurdere en forbindelse eller undersøge et stof virkninger på identificeret molekylære, cellulære eller biokemiske mål. De første trin i lægemiddeludvikling er identifikation og validering af potentielle lægemiddelmål involveret i sygdomme hos mennesker. Disse mål er typisk enten en cellulær struktur eller specifikt protein., Målene er:
- Receptorer
- Enzymer
- Hormoner og faktorer
- Nuclear receptors
- DNA
- Ion-kanaler
I den følgende fase af udvikling af lægemidler, biologiske assays og sammensatte screening assays er oprettet. Disse assays bruges til at identificere forbindelser, der har en ønsket aktivitet på lægemiddelmålet. Disse forbindelser kaldes” hit ” molekyler., I den indledende fase af hit compound identification, betegnet high throughput screening (HTS), testes et sammensat bibliotek, der indeholder mange potentielle hitmolekyler for at identificere eventuelle forbindelser med den ønskede aktivitet mod målet. Yderligere analyser er nødvendige for at teste hitmolekylets aktivitet på målet igen. Endelig bruges cellebaserede assays til at undersøge et lægemiddels toksicitet, sikkerhedsprofil og effektivitet. Hvert lægemiddel, der er udviklet, gennemgår en unik række assays, der er specielt designet og organiseret til det pågældende lægemiddelmål og stof., Denne proces betegnes assay udvikling.
vigtige faktorer i assayudvikling
udvikling af top-notch assays er afgørende for lægemiddelopdagelse og udvikling. Jo bedre de udviklede analyser er, desto færre potentielle problemer i de efterfølgende faser af forsknings-og udviklingsprocessen.Korrekt assay udvikling kræver nøje at overveje flere faktorer, herunder relevans, Reproducerbarhed, kvalitet, interferens og omkostninger.,
|
Faktor |
Betydning i Analysen Udvikling |
|
Tekst |
Forskning bør gennemføres for at undersøge muligheden af analysen at: 1. Forudsige den specifikke sygdomstilstand. 2. Identificere forbindelser, der udviser en passende virkningsmekanisme og styrke., |
|
Reproducerbarhed |
I et sammensat screening miljø, en analyse skal være reproducerbar. Dette betyder, at mulig Reproducerbarhed findes på tværs af assayplader, skærmdage og den fulde varighed af det specifikke lægemiddelopdagelsesprogram. |
|
Kvalitet |
Z-faktor er beregnet til at måle den effekt eller kvalitet af et HTS-analysen. Signalvinduet og variansen af negative og positive signaler bruges i denne beregning., Z ‘- faktoren skal være >0.4 for at blive betragtet som acceptabel til brug, hvor nogle forskere foretrækker en Di ‘- faktor på >0.6. |
|
interferens |
Der skal udarbejdes analyser, der tager hensyn til virkningerne af forbindelser, der er fundet i assayet, såsom de anvendte opløsningsmidler. |
|
Pris |
Foranstaltninger, der bør træffes foranstaltninger til med rimelighed at begrænse analysen omkostninger., |
– Analysen typer og teknologier
Analyser i drug discovery falder i to hovedkategorier: biokemiske analyser og celle-baserede assays.Biokemiske analyser er ofte den første type assay, der anvendes. Biokemiske analyser er værdifulde for at evaluere og undersøge målproteinet og identificere de forbindelser, der besidder den ønskede aktivitet på målet., Disse analyser er:
- Kan anvendes til enzym eller receptor-mål
- Er konsistente og pålidelige
- Er enklere end cellebaserede assays
Celle-baserede assays belyse sammensatte aktivitet via en funktionel læse-ud af sagde aktivitet. Cellebaserede assays følger ofte biokemiske assays., Disse analyser er:
- Kan anvendes til ion-kanaler, nuclear receptors eller membran receptorer
- Rapport om toksicitet, effektivitet og andre egenskaber af de ramte stof
- Er mere komplekse end biokemiske assays
Den følgende tabel viser en liste over nogle almindelige eksempler på biokemiske og celle-baserede assays.,scent Proximity Homogenous Assay (AlphaScreen Technology) for Protein-Protein Interaction
Viability Assays
Assay for Protease Cleavage Activity
Migration Assays
Reporter Gene Assays
G Protein-Coupled Receptor Assays